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本文目录一览：
- 1、质粒裂解系统
质粒裂解系统
1、试剂准备 溶液Ⅰ：50mM葡萄糖，25mM Tris-HCl(pH 0)，10mM EDTA(pH 0)。该溶液用于重悬细菌沉淀，保持细菌细胞壁的完整性。溶液Ⅱ：0.2N NaOH，1% SDS。此溶液为裂解液，用于破坏细菌细胞壁，使蛋白质和DNA变性。溶液Ⅲ：醋酸钾（KAc）缓冲液，pH 8。
2、(2)溶液Ⅱ的主要成分为氢氧化钠(NaOH)和SDS。DNA在pH5～9的溶液中是稳定的，但当pH＞12或pH＜3时，就会引起DNA双链之间氢键的解离而变性。溶液Ⅱ中NaOH浓度为0.2mob/L，加入溶液Ⅱ后，该系统的pH为10～16，因而促使染色体DNA与质粒的变性解离成单链。
3、综上所述，质粒提取（纯化）方法的选择应根据实验需求、操作便捷性、成本效益等因素综合考虑。在工业级制备中，可采用优化的层析法和质粒两相分离系统；在实验室质粒中大提中，可选择基于层析柱的质粒大提方法；在质粒小提中，硅基膜离心柱法和磁珠法都是常用的方法，可根据实验条件和需求进行选择。
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